Subklonlama veya primer walking olmadan plazmid, kozmid, fosmid veya BAC vektörlerinde tamamen sekans cDNA veya genomik klonlar.
EZ-Tn5 ™ Yerleştirme Kitleri *, primer yürüme veya alt klonlama olmaksızın, herhangi bir klonlanmış DNA> 2 kb’nin tam dizilişini basitleştirmek ve hızlandırmak için tasarlanmıştır. Basit, tek aşamalı bir in vitro reaksiyon, seçilebilir bir işaretleyici içeren tek bir EZ-Tn5 Transpozonun (kanamisin direnci (KAN), tetrasiklin direnci (TET) veya dihidrofolat redüktaz geni (DHFR) tarafından kodlanan trimetoprim direnci içeren rastgele sokulmasıyla sonuçlanır. – klonda. Ardından, E. coli hücrelerini reaksiyonun bir alikosu ile dönüştürün ve EZ-Tn5 Transpozonu tarafından kodlanan markör için seçin. İnsert transpozonun uçlarındaki primer bağlama bölgelerinden çift yönlü sekans ekleme klonları için kitlerde sağlanan primerleri kullanın.

Yüksek rasgelelik derecesi, primer bağlama bölgelerinin, klon boyunca dağılmasını ve primer yürüme veya alt klonlama ile karşılaştırıldığında çok daha iyi sekans kapsama alanı sağladığını garanti eder.
Tek bir reaksiyon, en büyük klonu bile dizmek ve genellikle alt klonlamayı geçiren veya sıralama primerlerini tasarlayıp sentezleyen zamandan tasarruf etmek için yeterli olacak şekilde 106 ekleme klonuna kadar çoğalır.
Herhangi bir klonu tamamen dizmek için tek bir dizi sıralama primeri kullanın (kitlerde bulunur).
EZ-Tn5 Sistemi, çok sayıda DNA örneğini işlemek için kullanılabilir ve bu da onu yüksek verimli bir dizi oluşturma hattının etkili bir bileşeni haline getirir.